كيفية استخدام الميكروتوم الدوار

يتم استخدام المشراح الدوار لإعداد أقسام الأنسجة للفحص والتشخيص المرضي. يتطلب قطع مقاطع البارافين عالية الجودة مهارة وخبرة واسعة. الاستخدام السليم للأداة يضمن دقة العينات وسلامتها وجودتها العالية. يوفر هذا الدليل إرشادات خطوة بخطوة لمساعدة المستخدمين على تشغيل المشراح الدوار بشكل فعال، سواء بالنسبة للأنسجة الروتينية أو تطبيقات البحث.

ما هو الميكروتوم الدوار

يعد تقطيع البارافين هو أسلوب التحضير الأكثر شيوعًا في علم الأنسجة. لا يقتصر تطبيقه على مراقبة شكل وبنية الخلايا الطبيعية، ولكنه أيضًا الطريقة الأساسية المستخدمة في علم الأمراض والطب الشرعي لدراسة ومراقبة وتحديد التغيرات في مورفولوجيا الأنسجة الخلوية. كما يستخدم باجتزاء البارافين على نطاق واسع في مجالات البحث العلمي الأخرى. يعد الميكروتوم الدوار أداة مساعدة شائعة الاستخدام لتضمين البارافين في علم الأمراض.

التطبيقات الرئيسية للميكروتومات الدوارة

1. المختبرات: تستخدم لمراقبة التركيب المورفولوجي لأنسجة الخلايا الحيوانية والنباتية الطبيعية.

2. المختبرات السريرية: تستخدم لمراقبة البنية المورفولوجية لأنسجة الخلايا الحيوانية والنباتية الطبيعية.

3. الجامعات ومراكز الأبحاث البيولوجية: تستخدم لدراسة وملاحظة وتحديد التغيرات المورفولوجية في أنسجة الخلايا.

4. شركات الأدوية والمختبرات الطبية: تستخدم في الكيمياء المناعية والتألق المناعي وتسلسل الجينوم وغيرها.

نوع المشراح

microtome الدوارة

سمات:

1. مجهزة بحامل شفرة

2. يمكن تركيب شفرة واحدة فقط في كل مرة للتقليم والتقسيم

المزايا: يسمح بالقطع المستمر، وهو مناسب بشكل خاص للخزعات، بما في ذلك عينات الخزعة بالإبرة

انزلاق مشراح

سمات:

1. أثناء التشذيب، تنزلق الشفرة مع العينة؛ أثناء التقسيم، تظل العينة ثابتة بينما تنزلق الشفرة.

2. يمكن تركيب شفرتين للتقليم والتقسيم.

المزايا:

1. يوفر الوقت عند قطع كتل الأنسجة الكبيرة.

2. يمكن تركيب شفرتين في وقت واحد للتشذيب والتقسيم، مما يوفر استخدام الشفرة.

3. يستخدم بشكل أساسي للبحث عن الأنسجة الكبيرة ومراقبة الأنسجة متعددة الطبقات.

العيوب:

1. يمكن القص مرة واحدة فقط في كل جلسة.

2. يتطلب تركيب جهاز لتنقية الهواء. القضاء على الكهرباء الساكنة يزيد من التكاليف.

3. غير مناسب لأقسام الأنسجة الصغيرة، بما في ذلك الخزعات بالمنظار.

4. قطع الأنسجة الصغيرة يستغرق وقتًا طويلاً ويبطئ سرعة التقطيع.

مشراح تهتز

سمات:

1. يقطع الأنسجة الطازجة بدون تثبيت أو تبريد.

2. يقطع المقاطع الأكثر سمكًا: 20-100 ميكرومتر

المزايا:

1. يتم الحفاظ على المواد القابلة للذوبان في الدهون والمستضدات السطحية في الأنسجة بشكل أفضل من عينات الأنسجة غير المجمدة، ولا تشكل بلورات، ولا تسبب أي ضرر للمستضدات في عينة الأنسجة.

2. يستخدم في المقام الأول لإظهار توزيع الأجسام المضادة في الجهاز العصبي، ومناسب بشكل خاص لمراقبة الفحص المجهري الإلكتروني المناعي.

أنواع الميكروتومات الدوارة

مشراح دوار يدوي:

عملية دوران عقارب. قد يؤدي استخدام تروس المحرك على المدى الطويل إلى التآكل، مما يؤثر على دقة الحقن ويؤدي إلى عدم عرض بيانات كافية، ولكنه منخفض التكلفة نسبيًا.

مشراح دوار نصف أوتوماتيكي:

نصف آلي ومجهز بمقبض حقن أو لوحة تحكم خارجية.

يضمن نظام الحقن الكهربائي دقة الحقن. يتمتع الجهاز بعمر افتراضي أطول، ويوفر عرضًا أكثر اكتمالاً للبيانات، ويتوافق بشكل أفضل مع السيناريوهات السريرية.

مشراح دوار تلقائي:

وظيفة التقطيع الأوتوماتيكية بالكامل، مجهزة بمقبض حقن أو لوحة تحكم خارجية، مؤتمتة بالكامل.

مشراح ناظم البرد:

وتسمح تقنيتها المبردة بمعالجة العينات بسرعة، مما يقلل من تأثير التثبيت الكيميائي على الأنسجة. يتم تشغيله عادةً بين -20 درجة مئوية و-30 درجة مئوية للحفاظ على السلامة الهيكلية والتشكل الخلوي لعينات الأنسجة.

مكونات ووظائف المشراح الدوار

المكونات الرئيسية للتشغيل اليومي للميكروتومات الدوارة:

حقن:

يستخدم نظام الحقن عالي الدقة مكونات رئيسية مثل المحامل الأسطوانية المتقاطعة والمغازل والمحركات السائر وقضبان التوصيل لضمان جودة تقطيع مستقرة وتلبية متطلبات دقة الحقن البالغة 0.5 ميكرومتر.

تثبيت:

يتميز المؤشر المرئي بمقاييس محددة على رأس العينة، مما يدعم التعديلات القابلة للعكس في الوقت الفعلي، ومناسب بشكل خاص للأنسجة السميكة أو المقاطع المدمجة المعدة بزوايا قطع خاصة.

التقطيع:

يتلقى جهاز التشفير عالي الدقة إشارات القطع التلقائية بسرعة، وعند الانتهاء من القطع، يتم تنشيط الفرامل الرقمية تلقائيًا لتأمين العجلة اليدوية، مما يعزز السلامة.

أمان:

يشتمل نظام العجلة اليدوية على آلية قفل مزدوج - قفل وقفل للعجلة اليدوية؛ يوفر جهاز التراجع حماية المستخدم.

كيفية استخدام الميكروتوم الدوار

I. أقسام شبه رقيقة

1. قم بتوصيل مصدر الطاقة وتشغيل المفتاح الرئيسي؛

2. حدد سمك القسم: نطاق سمك القسم النموذجي هو 0.25-100 ميكرومتر. استخدم الزرين '+' و'-' لضبط قيمة السُمك، بحيث تكون الوحدة ميكرومترًا؛

3. ضع الكتلة المضمنة في وسط رأس التقسيم، وشد برغي القفل، وتأمين العينة كما هو مطلوب؛

4. قم بتثبيت الشفرة الزجاجية مع علبة الماء (تأكد من قفل العجلة اليدوية قبل تثبيت الشفرة)، وقم بمحاذاة حافة الشفرة مع العينة؛

5. حدد وضع التقسيم: التقسيم التلقائي أو اليدوي. بعد تحديد الوضع، يعود الجهاز إلى الصفر، ويبدأ عد الأقسام؛

6. اجمع المقاطع: استخدم حلقة استرجاع المقاطع لاسترداد المقاطع الرقيقة العائمة في الماء وإرفاقها بالشريحة. يجفف عند درجة حرارة 40-60 درجة مئوية، ويصبغ باستخدام TBO، ثم يغسل، ثم يركب باستخدام 50% من الجلسرين للمراقبة والتصوير الفوتوغرافي.

ثانيا. أقسام البارافين

1. قم بتوصيل مصدر الطاقة وتشغيل المفتاح الرئيسي؛

2. حدد سُمك القسم: اضبط قيمة السُمك باستخدام الزرين '+' و'-'، الوحدة: ميكرومتر؛

3. ضع الكتلة المضمنة المعدة في وسط رأس التقسيم، وقم بتدوير برغي التثبيت، وتأمين العينة وفقًا للمتطلبات؛

4. قم بتثبيت حامل الشفرة، وأدخل شفرة يمكن التخلص منها، أو شفرة فولاذية التنغستن، أو شفرة فولاذية قطع قياسية (تأكد من قفل عجلة اليد قبل تثبيت الشفرة)، وقم بمحاذاة حافة الشفرة مع العينة؛

5. حدد وضع القطع: القطع التلقائي أو القطع اليدوي؛ بعد تحديد وضع القطع، يعود الجهاز إلى الصفر، ويبدأ عدد القطع؛

6. اجمع المادة المقطوعة: استخدم فرشاة لرفع شريط الشمع ووضعه في صندوق شرائح الشمع؛

7. التثبيت: استخدم سكينًا مستديرًا لقطع شريط الشمع، واختيار المادة السليمة، ووضعها على شريحة مطلية بزيت بياض البيض (أضف الماء المقطر إلى زيت بياض البيض للحفاظ على المادة عائمة على السطح)؛

8. التجفيف: على منضدة تجفيف بالتسخين الكهربائي، بمجرد أن تصبح المادة مسطحة، ضع الشريحة في صينية توزيع وجففها في فرن بدرجة حرارة ثابتة 36 درجة مئوية لمدة أربعة أيام تقريبًا أو في آلة تجفيف 60 درجة مئوية لمدة ساعتين؛

9. إزالة الشمع، والتلطيخ، والتركيب: إزالة شمع المادة بالزيلين، ثم صبغها وفقًا للغرض التجريبي. قم بتركيب المادة وتجفيفها باستخدام الراتنج المحايد أو الراتنج الكندي.

10 نصائح لتحسين جودة القسم

حافظ على حدة الشفرة: استبدل الشفرة أو اشحذها بانتظام لضمان الحدة وتقليل تلف القسم.

ضبط سرعة القطع: اضبط سرعة القطع وفقًا لنوع العينة لتجنب الأجزاء غير المستوية الناتجة عن السرعة الزائدة.

إبقاء العينة باردة: استخدم نظام تبريد أو مكعبات ثلج للحفاظ على درجة حرارة منخفضة للعينة وتقليل تشوه الأنسجة.

تأكد من أن طاولة القطع مستوية: تأكد من أن طاولة المشراح مستوية لتجنب الشرائح المنحرفة الناتجة عن زوايا القطع غير الصحيحة.

تنظيف المعدات: قم بتنظيف الميكروتوم بانتظام لمنع الغبار أو البقايا من التأثير على جودة الشريحة.

ضبط سمك الشريحة: اضبط سمك الشريحة حسب الحاجة لتجنب الشرائح السميكة جدًا أو الرفيعة جدًا.

التحقق من تثبيت العينة: تأكد من تثبيت العينة بشكل آمن لمنع الارتخاء أثناء القطع.

استخدم وسيلة القطع المناسبة: حدد وسيلة القطع المناسبة لتحسين تسطيح الشريحة.

تجنب القطع المفرط: تجنب القطع المستمر لفترة طويلة لمنع تلف العينة أو ارتفاع درجة حرارة الشفرة.

معايرة المعدات بانتظام: معايرة المشراح بانتظام لضمان دقته واستقراره.

نصائح صيانة المشراح الدوار

1. لا تستخدم أشياء صلبة أو حادة لكشط الجهاز؛

2. مسح السطح بالماء النظيف، وليس بالمواد الكيميائية؛

3. تجنب اهتزاز الجهاز أو اصطدامه به أثناء التشغيل؛

4. قم بربط جميع براغي الماكينة باستخدام الأدوات المتوفرة كل شهرين؛

5. إذا لم يتم استخدام الجهاز لفترة طويلة، فافصل سلك الطاقة، وقم بتخزين الجهاز بشكل صحيح، وقم بتغطية مكونات التصوير البصري بقطعة قماش لمنع تراكم الغبار.

خاتمة

في الختام، إتقان استخدام مشراح دوار أمر ضروري لتحقيق أقسام الأنسجة عالية الجودة في مختلف التطبيقات المعملية. ومن خلال اتباع إجراءات التشغيل المناسبة، وإجراء الصيانة الدورية، وضمان الإعدادات الصحيحة، يمكنك تحسين دقة وطول عمر معداتك. مع الممارسة، ستتمكن من الحصول على نتائج متسقة وموثوقة لتحليلك النسيجي.