كيفية استخدام microtome الدوارة

يتم استخدام microtome الدوار لإعداد أقسام الأنسجة للفحص المرضي والتشخيص. يتطلب قطع أقسام البارافين عالية الجودة مهارة وخبرة واسعة. يضمن الاستخدام السليم للأداة دقة السلامة والجودة العالية للعينات. يوفر هذا الدليل إرشادات خطوة بخطوة لمساعدة المستخدمين على تشغيل microtome الدوارة بشكل فعال ، سواء بالنسبة للتطبيقات الروتينية أو التطبيقات البحثية.

ما هو microtome دوار

قسم البارافين هو تقنية التحضير الأكثر شيوعا في الأنسجة. لا يقتصر تطبيقه على مراقبة التشكل وهيكل الخلايا الطبيعية ، ولكنه أيضًا الطريقة الأساسية المستخدمة في علم الأمراض والطب الجنائي لدراسة ومراقبة وتحديد التغييرات في مورفولوجيا الأنسجة الخلوية. كما يستخدم مقسمة البارافين على نطاق واسع في مجالات البحث العلمي الأخرى. Microtome الدوارة هو أداة مساعدة شائعة الاستخدام لتضمين البارافين في علم الأمراض.

التطبيقات الرئيسية من microtomes الدوارة

1. المختبرات: تستخدم لمراقبة الهيكل المورفولوجي لأنسجة الخلايا الحيوانية والنباتية الطبيعية.

2. المختبرات السريرية: تستخدم لمراقبة الهيكل المورفولوجي لأنسجة الخلايا الحيوانية والنباتية الطبيعية.

3. الجامعات ومراكز البحوث البيولوجية: تستخدم لدراسة ومراقبة وتحديد التغيرات المورفولوجية في أنسجة الخلايا.

4. شركات الأدوية والمختبرات الطبية: تستخدم في الكيمياء المناعية ، المناعة المناعية ، تسلسل الجينوم ، إلخ.

نوع microtome

microtome الدوارة

سمات:

1. مجهزة بحامل شفرة

2. يمكن تثبيت شفرة واحدة فقط في وقت واحد للتشذيب والقسمة

المزايا: يسمح بالقطع المستمر ، وخاصة مناسبة للخزعات ، بما في ذلك عينات خزعة الإبرة

انزلاق microtome

سمات:

1. أثناء التشذيب ، تنزلق الشفرة مع العينة ؛ أثناء التقسيم ، تظل العينة ثابتة بينما تنزلق الشفرة.

2. يمكن تثبيت شفرتين للتشذيب والقسمة.

المزايا:

1. يوفر الوقت عند قطع كتل الأنسجة الكبيرة.

2. يمكن تثبيت شفرتين في وقت واحد للتشذيب والقسمة ، وتوفير استخدام الشفرة.

3. يستخدم في المقام الأول للبحث عن الأنسجة الكبيرة ومراقبة الأنسجة متعددة الطبقات.

عيوب:

1. يمكن قطع مرة واحدة فقط لكل جلسة.

2. يتطلب تركيب جهاز تنقية الهواء ؛ التخلص من الكهرباء الثابتة يزيد من التكاليف.

3. غير مناسب لأقسام الأنسجة الصغيرة ، بما في ذلك الخزعات بالمنظار.

4. قطع الأنسجة الصغيرة يستغرق وقتًا طويلاً ويبطئ سرعة التقسيم.

اهتزاز microtome

سمات:

1. يقطع الأنسجة الطازجة دون تثبيت أو تبريد.

2. قطع الأقسام السميكة: 20-100 ميكرون

المزايا:

1. المواد القابلة للذوبان في الدهون والمستضدات السطحية في الأنسجة يتم الحفاظ عليها بشكل أفضل من عينات الأنسجة غير المجمدة ، ولا تشكل بلورات ، ولا تتسبب في أي ضرر للمستضدات في عينة الأنسجة.

2. يستخدم في المقام الأول لإظهار توزيع الأجسام المضادة في الجهاز العصبي ، وخاصة مناسبة لمراقبة المجهر الإلكتروني المناعي.

أنواع microtomes الدوارة

microtome الدوارة اليدوية:

عملية دوران العجلة. قد يسبب الاستخدام طويل الأجل لعروض المحرك التآكل والدموع ، مما يؤثر على دقة الحقن ويؤدي إلى عدم كفاية عرض البيانات ، لكنه منخفض التكلفة نسبيًا.

microtome الدوارة شبه التلقائية:

شبه آلي ، مزود بمقبض الحقن أو لوحة تحكم خارجية.

نظام الحقن الكهربائي يضمن دقة الحقن. يتمتع الجهاز بعمر أطول ، ويوفر عرض بيانات أكثر اكتمالا ، ويتوافق بشكل أفضل مع السيناريوهات السريرية.

microtome الدوارة التلقائية:

وظيفة التقطيع التلقائي بالكامل ، مزودة بمقبض حقن أو لوحة تحكم خارجية ، مؤتمتة بالكامل.

microtome cryostat:

تتيح تقنيةها المبردة معالجة العينات بسرعة ، مما يقلل من تأثير التثبيت الكيميائي على الأنسجة. تعمل عادة بين -20 درجة مئوية و -30 درجة مئوية للحفاظ على السلامة الهيكلية والمورفولوجيا الخلوية لعينات الأنسجة.

مكونات ووظائف microtome الدوارة

المكونات الرئيسية للتشغيل اليومي للميكروتوم الدوار:

حقن:

يستخدم نظام الحقن عالي الدقة المكونات الرئيسية مثل محامل الأسطوانة المتقاطعة ، والمغزل ، ومحركات السائر ، وقضبان التوصيل لضمان جودة التقسيم المستقر وتلبية متطلبات دقة الحقن من 0.5 ميكرون.

تثبيت:

يتميز المؤشر المرئي بمقاييس ملحوظة على رأس العينة ، ودعم التعديلات في الوقت الفعلي ، وعلاجها ، وخاصة مناسبة للأنسجة السميكة أو الأقسام المدمجة التي يتم تحضيرها في زوايا القطع الخاصة.

التقطيع:

يتلقى المشفر العالي الدقة بسرعة إشارات القطع التلقائية ، وعند الانتهاء من القطع ، يتم تنشيط الفرامل الرقمية تلقائيًا لتأمين عجلة اليد ، مما يعزز السلامة.

أمان:

يشتمل نظام العجلة على آلية قفل مزدوجة-قفل العجل والقفل ؛ يوفر جهاز التراجع حماية المستخدم.

كيفية استخدام microtome دوار

1. أقسام شبه رقيقة

1. قم بتوصيل مصدر الطاقة وقم بتشغيل المفتاح الرئيسي ؛

2. حدد سماكة القسم: نطاق سمك القسم النموذجي هو 0.25-100 ميكرون. استخدم الأزرار '+' و '-' لضبط قيمة السماكة ، مع أن الوحدة هي μM ؛

3. ضع الكتلة المدمجة في مركز رأس التقسيم ، وشد المسمار القفل ، وقم بتأمين العينة كما هو مطلوب ؛

4. قم بتركيب الشفرة الزجاجية مع صينية الماء (تأكد من قفل العجلة قبل تثبيت الشفرة) ، وتوافق على حافة الشفرة مع العينة ؛

5. حدد وضع التقسيم: التقسيم التلقائي أو اليدوي. بعد تحديد الوضع ، يعود الأداة إلى الصفر ، ويبدأ عد القسم ؛

6. اجمع الأقسام: استخدم حلقة استرجاع قسم لاسترداد الأقسام الرقيقة التي تطفو في الماء وإرفاقها بشريحة. تجف عند 40-60 درجة مئوية ، وصمة عار مع TBO ، وغسل ، وجبل مع 50 ٪ الجلسرين للمراقبة والتصوير الفوتوغرافي.

الثاني. أقسام البارافين

1. قم بتوصيل مصدر الطاقة وقم بتشغيل المفتاح الرئيسي ؛

2. حدد سماكة القسم: اضبط قيمة السماكة باستخدام أزرار '+' و '-' ، الوحدة: μM ؛

3. ضع الكتلة المضمنة المعدة في مركز رأس التقسيم ، وتدوير المسمار التثبيت ، وتأمين العينة وفقًا للمتطلبات ؛

4. قم بتثبيت حامل الشفرة ، أو إدراج شفرة يمكن التخلص منها ، أو شفرة الصلب التنغستن ، أو شفرة الفولاذ القطع القياسية (تأكد من أن العجلة اليدوية مغلقة قبل تثبيت الشفرة) ، وتوافق على حافة الشفرة مع العينة ؛

5. حدد وضع القطع: القطع التلقائي أو القطع اليدوي ؛ بعد اختيار وضع القطع ، يعود الأداة إلى الصفر ، ويبدأ عدد القطع ؛

6. اجمع المادة المقطوعة: استخدم فرشاة لرفع شريط الشمع ووضعه في صندوق الشمع ؛

7. التثبيت: استخدم سكينًا مستديرًا لقطع شريط الشمع ، واختر المادة سليمة ، ووضعها على شريحة مغلفة بزيت أبيض البيض (أضف الماء المقطر إلى زيت البيض البيض للحفاظ على المواد العائمة على السطح) ؛

8. التجفيف: على مقعد تجفيف التدفئة الكهربائية ، بمجرد أن تكون المادة مسطحة ، ضع الشريحة في صينية انتشار وتجفيفها في فرن درجة حرارة ثابتة 36 درجة مئوية لمدة أربعة أيام تقريبًا أو في آلة تجفيف 60 درجة مئوية لمدة ساعتين ؛

9. تجديد شمع ، تلطيخ ، وتثبيت: Dewax من المواد مع زيلين ، ثم تلطخها وفقًا للغرض التجريبي. تركيب وتجفيف المادة باستخدام الراتنج المحايد أو الراتنج الكندي.

10 نصائح لتحسين جودة القسم

حافظ على حادة الشفرة: استبدال الشفرة أو شحذها بانتظام لضمان الحدة وتقليل تلف القسم.

اضبط سرعة القطع: اضبط سرعة القطع وفقًا لنوع العينة لتجنب الأقسام غير المتكافئة الناجمة عن السرعة المفرطة.

حافظ على عينة باردة: استخدم نظام تبريد أو مكعبات ثلج للحفاظ على درجة حرارة منخفضة للعينة وتقليل تشوه الأنسجة.

تأكد من أن جدول القطع هو المستوى: تأكد من أن جدول Microtome هو مستوى لتجنب شرائح منحرفة الناجمة عن زوايا القطع غير الصحيحة.

تنظيف المعدات: قم بتنظيف microtome بانتظام لمنع الغبار أو البقايا من التأثير على جودة الشريحة.

اضبط سمك الشريحة: اضبط سمك الشريحة حسب الحاجة لتجنب الشرائح السميكة جدًا أو رقيقة جدًا.

تحقق من تثبيت العينة: تأكد من تثبيت العينة بشكل آمن لمنع التغلب أثناء القطع.

استخدام وسط القطع المناسبة: حدد وسيلة قطع مناسبة لتحسين تسطيح الشريحة.

تجنب القطع المفرطة: تجنب القطع المستمر لفترة طويلة لمنع تلف العينة أو ارتفاع درجة حرارة الشفرة.

معايرة الجهاز بانتظام: معايرة Microtome بانتظام لضمان دقتها واستقرارها.

نصائح صيانة microtome الدوارة

1. لا تستخدم كائنات صلبة أو حادة لكشط الجهاز ؛

2. امسح السطح بالماء النظيف ، وليس العوامل الكيميائية ؛

3. تجنب هز الماكينة أو تصطدمها أثناء التشغيل ؛

4. تشديد جميع البراغي على الجهاز باستخدام الأدوات المقدمة كل شهرين ؛

5. إذا لم يتم استخدام الماكينة لفترة طويلة ، قم بفصل سلك الطاقة ، وتخزين الجهاز بشكل صحيح ، وتغطية مكونات التصوير البصري بقطعة قماش لمنع تراكم الغبار.

خاتمة

في الختام ، يعد إتقان استخدام microtome الدوار أمرًا ضروريًا لتحقيق أقسام الأنسجة عالية الجودة في تطبيقات المختبرات المختلفة. من خلال اتباع إجراءات التشغيل المناسبة ، وإجراء الصيانة العادية ، وضمان الإعدادات الصحيحة ، يمكنك تعزيز دقة وطول المعدات الخاصة بك. مع الممارسة ، ستتمكن من تحقيق نتائج متسقة وموثوقة لتحليلك النسيجي.